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  • 本发明提供一种促进小鼠胚胎干细胞向全能性干细胞转化的培养方法,细胞能够在该条件下保持在一个全新的形态并传代培养。本发明采用的方法是在培养基组成为10%胎牛血清的DMEM培养基中,按1:1000比例添加2μM H4K16ac的抑制剂WM‑38...
  • 本发明涉及水产动物细胞培养技术领域,尤其涉及一种豹纹鳃棘鲈性腺体细胞快速富集分离方法。包括:选取健康豹纹鳃棘鲈进行麻醉;取性腺组织,经无菌处理、剪碎、离心洗涤及过滤后,接种于培养基中进行原代培养,获得从组织块中迁出的性腺细胞,经胰蛋白酶‑E...
  • 本发明提供一种将人多能干细胞诱导分化为功能性肠类器官的方法,属于干细胞技术与类器官工程领域。本发明核心在于提供一套成分明确、阶段清晰的培养基配方体系,能够高效引导肠类器官向包含上皮细胞、神经内分泌细胞、内皮细胞在内的多种功能性细胞谱系分化,...
  • 本发明公开了一种冠脉微循环障碍细胞模型的构建方法,属于生物医药技术领域。该方法以小鼠心脏微血管内皮细胞(MCMEC)为对象,使用四氯氢醌(TCHQ)在20‑40μM浓度下处理6小时,诱导细胞出现凋亡、活性氧(ROS)升高、一氧化氮(NO)降...
  • 本发明提供了一种无Matrigel的外翻纤毛类器官及其培养方法和应用,本发明方法采用无血清无BPE扩增体系+无Matrigel外翻纤毛类器官+高通量兼容的培养方法及其外翻纤毛的分化培养基,通过鼻拭子无创取样、化学成分明确的培养体系,以及无需...
  • 本发明公开了一种卵巢子宫内膜异位症腺上皮类器官与间质细胞共培养模型及其构建方法,该构建方法包括以下步骤:S1,构建卵巢子宫内膜异位囊肿腺上皮类器官;S2,构建卵巢子宫内膜异位囊肿间质细胞的3D培养体;S3,将腺上皮类器官消化处理,与间质细胞...
  • 本发明公开一种肝脏类器官培养基及其培养方法、肝脏类器官和应用,属于生物医药技术领域,所述肝脏类器官培养基为含豆甾醇、胎牛血清、B27补充剂、N‑乙酰半胱氨酸、烟酰胺、重组人亮氨酸15‑胃泌素I、重组鼠表皮细胞生长因子、重组人成纤维细胞生长因...
  • 本发明涉及畜牧繁殖生物技术领域,公开了本发明的目的之一在于提出一种促进猪卵巢颗粒细胞增殖的方法,将猪卵泡液外泌体加入猪卵巢颗粒细胞培养体系中,以有效浓度作用一定时间,从而提高颗粒细胞的增殖活力,经外泌体处理后能够降低颗粒细胞的凋亡率、提高细...
  • 本发明涉及生物工程技术领域,具体涉及一种以海洋动物源组织为原料的外泌体分离及浓缩方法。包括以下步骤:海洋动物源组织样品冻干、粉碎;样品酶解;杂质脱除与浓缩。本发明通过冻干粉碎与复合酶解工艺,将细胞中的外泌体充分游离出来,并借助超声震荡,加快...
  • 本发明建立了一种渗透压–营养双适配的海洋无脊椎动物原代细胞培养方法,首次系统揭示并解决了海洋无脊椎动物原代细胞培养过程中普遍存在的渗透压适配失准和营养供给失配两大关键技术问题,构建了兼具普适性与可调性的动态渗透压补偿机制及种属特异性营养供给...
  • 本发明涉及一种高通量悬浮细胞球组装体的制备方法及装置,属于生物细胞三维培养技术领域。针对现有三维细胞球体组装技术操作复杂、通量低、依赖外场引导且对细胞活性干扰大的问题,本发明提供了一种利用悬浮细胞球体密度低于培养液而稳定上浮至液滴顶端的物理...
  • 本发明提供了一种生产类胡萝卜素的方法。该酵母产类胡萝卜素的方法包括如下步骤:将酵母菌株进行发酵培养,菌体生长进入停滞期时,加入D‑半乳糖诱导,诱导结束后,在产物合成阶段使用柠檬酸‑氨水联合调节发酵过程的体系pH为5.6‑6.2,其中氮源补充...
  • 本发明公开一种纤维素降解产酸菌群的定向驯化方法及藻泥厌氧产酸强化方法。以厌氧污泥为菌源,在含无机盐、缓冲盐和还原剂的厌氧培养基中,以羧甲基纤维素钠作为限制性底物、以葡萄糖作为辅助启动碳源进行连续传代驯化;每代结束按5%~20%(v/v)转接...
  • 本发明公开了一种用于溴氰菊酯污染土壤的黑曲霉修复剂及制备方法,涉及物流监控领域,包括:配置含溴氰菊酯的液体培养体系,设定溴氰菊酯浓度梯度阶梯驯化与连续传代,执行驯化菌体采集与干菌体质量归一化,执行单位干菌体的酯酶活性检测与活性提升幅度确认。...
  • 本发明提供了一种贝氏不动杆菌及其应用,尤其提供了一种具有高筛选通量的敲除了hpxO基因的贝氏不动杆菌(Acinetobacter baylyi)Ab‑ZEN2及其应用,保藏编号为GDMCC No:67727。该菌株可用于测试一个备选的基因编...
  • 本发明公开了一组鰤鱼诺卡氏菌分枝菌酸合成酶基因及其缺失株的构建与应用方法,属于疾病防控技术领域,包括以下步骤:菌株培养与全基因组提取、特异性引物设计与基因片段克隆、缺失质粒构建、感受态细胞制备、电转化与缺失株筛选、缺失株特性验证。通过解析鰤...
  • 本发明公开了一种基于谷氨酸棒状杆菌CPSPC系统的产D‑泛酸的基因工程菌、构建方法及其应用,以野生型C.glutamicum ATCC 13032为底盘菌株,通过荧光蛋白mCherry验证了来自枯草芽孢杆菌的甘氨酸核糖体开关BsGR与启动子...
  • 本发明提供了一种复合菌剂及其在降解淀粉和生物燃料电池中的应用,属于环境生物技术与生物电化学交叉技术领域;本发明通过合成生物学策略构建一个由三种微生物组成的复合菌剂;所述复合菌剂包括将淀粉快速转化为易于利用的单糖的基因工程大肠杆菌、承接上游代...
  • 本发明提出一种高效生产β‑丙氨酸的基因工程菌株,采用基因工程手段对大肠杆菌菌株进行改造,构建了多质粒系统,以优化代谢途径和提高产物合成效率。首先,通过构建重组质粒pET‑PanD,引入带有突变的天冬氨酸脱羧酶(L17F/G24R突变体),以...
  • 本文提供一种改善乙酸生成的遗传工程改造方法及其应用。具体地,本文提供了一种重组原核细胞,其经定向遗传工程改造而包含选自下组的一个或多个基因的缺陷:galK、galT、galE、modF、modE、acrZ、modA、modB、modC、yb...
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