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  • 本发明涉及工程细胞技术领域,具体涉及一种基于细胞转染和细胞内胶凝的双模态工程细胞及其构建方法。双模态工程细胞的细胞表面过表达有目标细胞膜蛋白,且细胞内胶凝化。制备过程包括:制备转染有目标细胞膜蛋白基因的细胞;将转染有目标细胞膜蛋白基因的细胞...
  • 本发明提供一种脂肪细胞、白色脂肪棕色化的细胞模型及构建方法和应用,涉及生物医药技术领域,所述脂肪细胞内包含外源的特异性抑制Kdm7a基因表达的核酸构建物;脂肪细胞中内源性Kdm7a基因的表达被抑制且表达解偶联蛋白1。通过特异性抑制Kdm7a...
  • 本发明公开了一种稳定表达多蛋白标签的细胞株及其构建方法和应用,属于生物技术领域。细胞株通过慢病毒载体转染,将含有P2A自剪切多肽与多种蛋白标签编码序列的融合表达载体整合至宿主细胞,经抗生素筛选获得稳定表达细胞株,表达绿色荧光蛋白在内的多种蛋...
  • 本发明涉及一种iPSC‑MSC来源的工程化外泌体及其制备方法与应用,属于生物技术领域。本发明提供一种双模块工程化策略:首先,通过基因工程使诱导多能干细胞来源的间充质干细胞过表达缺氧调控因子FIH‑1蛋白,并从中提取负载该蛋白的外泌体;其次,...
  • 本发明属于生物技术领域,公开了一种敲除CALR基因的H1299细胞株,所述的H1299细胞株中,敲除前的CALR基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,敲除后的CALR基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;本发明通过CRISP...
  • 本发明属于生物技术领域,涉及FAT10基因在炎症介导的胰岛β细胞模型的构建及药物筛选中的应用。该FAT10过表达胰岛β细胞通过模拟炎症通过诱导类泛素蛋白FAT10表达促进胰岛β细胞凋亡的方法,可用于构建炎症介导的胰岛β细胞死亡模型及靶向药物...
  • 本发明属于生物医药技术领域,公开了一种同时表达抗原靶向抗体和CD9的外泌体。该外泌体表面表达抗原靶向抗体和CD9的融合蛋白。本发明还提供了制备该外泌体的方法。本发明的外泌体能够增加外泌体靶向抗原及被靶细胞摄取的能力。
  • 本发明属于生物医药技术领域,公开了一种同时表达抗原靶向抗体和VSVG外泌体及其制备方法与应用,该外泌体表面表达抗原靶向抗体和VSVG的融合蛋白。本发明获得了同时表达抗原靶向抗体与VSVG的外泌体,实现了外泌体的靶向性,增强了外泌体的膜融合能...
  • 本发明属于生物医药,公开了一种表达抗原靶向抗体的增强型外泌体及其制备方法与应用。该外泌体表面表达抗原靶向抗体,抗原靶向抗体包含:1)信号肽;2)组氨酸标签(His‑tag)和Flag标签;3)靶向抗原的单链抗体区域;4)铰链区;5)跨膜区;...
  • 本发明属于生物医药技术领域,公开了一种同时表达抗原靶向抗体、CD9和VSVG的外泌体及其制备方法与应用,该外泌体表面表达抗原靶向抗体、CD9和VSVG的融合蛋白。本发明利用基因工程策略实现抗原靶向抗体、CD9和VSVG融合蛋白在外泌体的修饰...
  • 本发明提供了一种高效泛癌和胎盘靶向的工程化细胞外囊泡制备方法和应用,该工程化细胞外囊泡表面同时表达plCSA ‑ BPs靶向多肽且过表达免疫抑制蛋白,plCSA ‑ BPs靶向多肽选自SEQ ID NO : 1至7中任一条所示多肽等,免疫抑...
  • 本申请涉及一种制备iPSC及分化成iNKT细胞的方法,其包含:(1)将重编程诱导因子导入iNKT细胞后进行重编程;(2)培养重编程后的细胞,获得iPSCs,其中培养过程包含:(a)将重编程后的细胞在包含碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的培...
  • 本发明提供了一种增强肿瘤杀伤能力的工程化细胞及其应用,所述工程化细胞定点整合有编码表达分泌性蛋白的多核苷酸;所述分泌性蛋白包括:(1)第一分泌性蛋白和第二分泌性蛋白;所述第一分泌性蛋白为免疫检查点分子PD1的抑制剂;所述所述第二分泌性蛋白和...
  • 本发明公开了一种从肝癌细胞培养基上清液中提取外泌体的分离方法,具体为:(1)将肝癌细胞培养基上清液离心过膜,超声纳滤后重悬得到外泌体粗提取液;(2)将外泌体粗提取液用尺寸排阻色谱柱纯化,超速离心后得到外泌体粗沉淀;(3)将外泌体粗沉淀用膜蛋...
  • 本发明公开了一种卵巢癌类器官‑巨噬细胞共培养体系及其制备方法和应用,制备方法包括如下步骤:提供卵巢癌细胞;将卵巢癌细胞重悬于基质胶中,接着将重悬有卵巢癌细胞的基质胶接种至培养容器内,待基质胶完全凝固后加入卵巢癌类器官完全培养基进行,培养得到...
  • 本发明涉及生物技术领域,具体涉及动物肿瘤组织消化液及其应用。本发明提供的消化液适用性广泛,能够克服现有技术中存在的物种壁垒,实现跨物种通用,且适用于多种肿瘤组织,进而实现了种属多用、一盒多用,普适性高。本发明提供的温和高效的解离方案极大限度...
  • 本发明涉及一种可灌注血管化宫颈癌类器官芯片的构建方法,涉及生物技术领域。包括:S1、构建宫颈癌类器官;S2、将宫颈癌类器官小细胞团、人脐静脉内皮细胞和人胚肺成纤维细胞按比例混合,混合细胞于低吸附U型板中离心聚集成预血管化宫颈癌类器官;S3、...
  • 本发明涉及细胞培养技术领域,尤其涉及一种造血干细胞体外扩增培养体系及其造血干细胞的体外扩增方法。本发明通过不同的培养基进行分步培养,实现了对HSCs体外生命周期的时序性更为精密调控:通过第一培养基进行第一步的活化启动培养,通过第二培养基进行...
  • 本发明涉及一种用于培养kupffer细胞的组合物及其应用,所述用于培养kupffer细胞的组合物包括M‑CSF、HGF和EGF。本发明在kupffer细胞无血清培养基中加入M‑CSF、HGF和EGF,能够替换血清的功能,实现对于Kupffe...
  • 本发明公开了一种用于培养树突状细胞的培养基组合以及培养方法,属于生物医药领域。针对现有DC诱导分化周期长且纯度低的问题,本发明提供了一种用于培养树突状细胞的培养基组合,包括基础培养基,诱导培养基,成熟培养基以及功能强化培养基,所述诱导培养基...
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