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龙图腾网获悉湖南省中医药研究院申请的专利一种雪峰虫草遗传转化体系的建立方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN120775892B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-28发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510992184.2，技术领域涉及：C12N15/80；该发明授权一种雪峰虫草遗传转化体系的建立方法是由冯晓婷;张水寒;盛欣瑶;刘君;周融融设计研发完成，并于2025-07-18向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种雪峰虫草遗传转化体系的建立方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种雪峰虫草遗传转化体系的建立方法。属于微生物遗传转化技术领域。本发明提供了雪峰虫草原生质体制备和PEG‑CaCl2介导的遗传转化体系的构建方法，以及以潮霉素B为抗性标记的筛选体系；成功利用PEG介导将潮霉素B的hph基因转化至雪峰虫草菌中，转化子经4代转接后，仍能检测到目的基因，表明成功构建了遗传转化体系。通过遗传转化，可以通过基因敲除或过表达实验以探索特定基因在雪峰虫草子实体发育过程中的具体功能及其机制。

本发明授权一种雪峰虫草遗传转化体系的建立方法在权利要求书中公布了：1.一种雪峰虫草遗传转化体系的建立方法，其特征在于，包括如下步骤： 1原生质体的制备： 11将雪峰虫草活化后接种到PDP液体培养基或PY液体培养基，20~30℃、100~150rpm培养3~7天； 所述PDP液体培养基组分包括：马铃薯200gL、葡萄糖20gL、蛋白胨3gL和KH2PO41gL； 所述PY液体培养基组分包括：葡萄糖15gL、蛋白胨5gL、酵母粉2gL、KH2PO41gL和MgSO4·7H2O0.5gL； 12将雪峰虫草菌与裂解酶液混合，二者质量体积比为450~550：4~6mgmL，之后32~35℃酶解3~5h； 所述裂解酶液包括溶壁酶、蜗牛酶和S1缓冲液，三者质量体积比为0.1g:0.1g:10mL； 所述S1缓冲液的组分包括甘露醇145.72gL； 13酶解后使用S1缓冲液漂洗，之后过滤、离心即可； 所述离心的参数为4000rpm离心10min； 2原生质体转化： 21将雪峰虫草原生质体稀释得到原生质体悬浮溶液； 将雪峰虫草原生质体稀释到107个mL； 22向原生质体悬浮溶液中加入潮霉素表达盒，置于冰上5min，得到第一转化溶液； 雪峰虫草原生质体悬浮溶液与潮霉素表达盒的体积比为20:1； 23缓慢逐滴加入S3缓冲液，混匀后置于冰上30min，得到第二转化溶液； 所述S3缓冲液包括如下质量浓度的组分： 25%PEG4000、10mMTirs-HCl和25mMCaCl2，pH调至7.5； 24继续加入S3缓冲液，室温放置5min，继续加入S2缓冲液，混匀，得到第三转化溶液； 所述S2缓冲液包括如下质量浓度的组分： 0.6M甘露醇、10mMTirs-HCl和25mMCaCl2，pH调至7.5； 25向第三转化溶液中加入TB3液体培养基过夜复苏培养，离心、重悬，得到复苏转化溶液； 所述TB3液体培养基组分包括：甘露醇109.3gL、酵母粉3gL、酸水解酪蛋白3gL和蔗糖20gL； 26将所述复苏转化溶液进行筛选培养，筛选培养基中潮霉素B的含量为150μgmL； 复苏转化溶液和筛选培养基的体积比为1~2：30； 雪峰虫草原生质体悬浮溶液、步骤25的S3缓冲液和步骤26的TB3液体培养基的体积比为1:5:25。

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