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清华大学李景虹获国家专利权

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龙图腾网获悉清华大学申请的专利一种高效染色质DNA结合图谱测序方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116218971B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-28发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310031360.7,技术领域涉及:C12Q1/6869;该发明授权一种高效染色质DNA结合图谱测序方法是由李景虹;滕续聪;戴依聪设计研发完成,并于2023-01-10向国家知识产权局提交的专利申请。

一种高效染色质DNA结合图谱测序方法在说明书摘要公布了:本发明公开一种高效染色质DNA结合图谱测序方法,本发明方法采用BAMEA‑Tn5转座酶,BAMEA‑Tn5转座酶为将特异性识别所述转录因子的核酸适配体序列添加到Tn5转座酶的接头序列的5’端,且5’端带有修饰基团,进而构建得到;本发明实施例方法是通过BAMEA‑Tn5转座酶作用,基于核酸适配体的识别能力将Tn5酶靶向至细胞内的转录因子位点,并通过Tn5酶的剪切活性在染色质DNA与转录因子结合的位点添加BAMEA接头序列与标签。本发明测序方法采用核酸适配体靶向识别转录因子,极大程度地降低了测序成本,且核酸适配体性能稳定,重现性强。

本发明授权一种高效染色质DNA结合图谱测序方法在权利要求书中公布了:1.一种染色质DNA结合图谱测序方法,其特征在于,包括如下步骤:1收集细胞,加入甲醛溶液,使转录因子与DNA交联;2将活化后的磁珠加入细胞中孵育,再分离收集磁珠;3加入通透封闭液进行孵育,再分离收集磁珠;4加入含BAMEA-Tn5转座酶且不含转座酶激活剂的溶液孵育,再分离收集磁珠;5洗涤细胞后,再加入含有转座酶激活剂的缓冲液孵育;6向步骤5的溶液中再加入MEB-Tn5转座酶,继续孵育细胞;7用链霉亲和素磁珠回收酶切后的片段;8PCR建库,二代测序;其中, 所述BAMEA-Tn5转座酶为将特异性识别所述转录因子的核酸适配体序列添加到Tn5转座酶的接头序列的5’端,且5’端带有修饰基团,进而构建得到的;所述MEB-Tn5转座酶为5’端含有常规接头序列的Tn5转座酶, 所述BAMEA-Tn5转座酶是将BAMEA-Tn5接头序列与Tn5转座酶等摩尔混合后孵育获得,其中所述BAMEA-Tn5接头序列由等摩尔的BAMEA序列和ME序列退火杂交形成,所述ME序列如SEQIDNo.2所示,并且所述BAMEA序列的结构为5’-B-A-L-MEA-3’,其中,B为生物素,A为核酸适配体序列,L为连接臂,其中所述MEA的序列如SEQIDNo.1所示;并且 所述MEB-Tn5转座酶是将MEB-Tn5接头序列与Tn5转座酶等摩尔混合后孵育获得;其中所述MEB-Tn5接头序列由等摩尔的MEB序列和ME序列退火杂交形成,其中所述ME序列如SEQIDNo.2所示,所述MEB序列如SEQIDNo.3所示。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人清华大学,其通讯地址为:100084 北京市海淀区清华园;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

以上内容由龙图腾AI智能生成。

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