中国科学院海洋研究所毕允晨获国家专利权
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龙图腾网获悉中国科学院海洋研究所申请的专利一种病毒来源的几丁质合成酶的表达纯化方法及其用途获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115820594B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-21发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211680452.X,技术领域涉及:C12N9/10;该发明授权一种病毒来源的几丁质合成酶的表达纯化方法及其用途是由毕允晨;牛苏昊;张潇月;李鹏伟设计研发完成,并于2022-12-27向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种病毒来源的几丁质合成酶的表达纯化方法及其用途在说明书摘要公布了:本发明属于生物酶技术领域,具体涉及病毒来源的几丁质合成酶的表达纯化方法及其用途。一种病毒来源的几丁质合成酶的表达纯化方法,包括:对病毒来源的几丁质合成酶基因序列按照大肠杆菌密码子偏好性进行密码子优化,得到核苷酸序列如SEQIDNO.1所示的基因序列;将优化后的基因序列全基因合成至表达载体上;含有表达载体的宿主经培养、诱导、裂解和离心,获得含病毒来源的几丁质合成酶的膜组分。本发明提供了一种病毒来源的几丁质合成酶的纯化方法,利用大肠杆菌异源表达与类生物膜体系分离纯化的策略,通过该策略可以获得高纯度的病毒来源的几丁质合成酶。并提供了一种合成低聚几丁寡糖的新方法,且反应体系组成简单,产物易于分离纯化。
本发明授权一种病毒来源的几丁质合成酶的表达纯化方法及其用途在权利要求书中公布了:1.一种病毒来源的几丁质合成酶的表达纯化方法,其特征在于,包括:对病毒来源的几丁质合成酶基因序列按照大肠杆菌密码子偏好性进行密码子优化,得到核苷酸序列如SEQIDNO.1所示的基因序列;并将优化后的基因序列全基因合成至表达载体上;含有表达载体的宿主经培养、诱导、裂解和离心,获得含病毒来源的几丁质合成酶的膜组分;所述几丁质合成酶在无受体N-乙酰氨基葡萄糖存在下合成以几丁五糖为主的低聚几丁寡糖;获得含病毒来源的几丁质合成酶的膜组分后使用去垢剂对其进行纯化,纯化步骤包括:构建类生物膜体系;采用金属亲和层析去除杂蛋白,并洗脱、浓缩;采用分子排阻层析对浓缩液进行纯化;类生物膜体系的构建中,将含有病毒来源的几丁质合成酶的膜组分,按照膜组分与溶液质量体积比1g:20-40mL加入置换缓冲液;所述置换缓冲液的成分中包含去垢剂。
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