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龙图腾网获悉江苏省中医院申请的专利一种益肾清利活血方的质量检测方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN117388397B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-14发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202311350918.4，技术领域涉及：G01N30/02；该发明授权一种益肾清利活血方的质量检测方法是由孙伟;陈翀;孙斯凡;赵静;何伟明设计研发完成，并于2023-10-18向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种益肾清利活血方的质量检测方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种益肾清利活血方的质量检测方法，该方法包括供试品溶液的制备、标准品溶液的配置、标准曲线的制备和含量测定。本发明通过大量实验筛选出最佳的供试品制备方法、对照品的制备方法和最佳的色谱条件和质谱分析条件，建立的益肾清利活血方的含量测定方法，能同时检测白藜芦醇、大黄酸、芒柄花黄素、芦荟大黄素、大黄素、绿原酸、虎杖苷、落新妇苷、金丝桃苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、β‑蜕皮甾酮等不同结构类型的11种化合物的含量。该方法有利于全面监控益肾清利活血方药物的质量，保证临床疗效。并且该方法具有稳定性好、准确度高、重复性好、精密度高等优点。

本发明授权一种益肾清利活血方的质量检测方法在权利要求书中公布了：1.一种益肾清利活血方的质量检测方法，其特征在于，它包括以下步骤： 步骤1：益肾清利活血方供试品溶液的制备 称取一定量的益肾清利活血方中药，适当粉碎，用50%甲醇溶解于25mL容量瓶中，加入50%甲醇定容，超声提取20min，得到益肾清利活血方提取液；精密移取5mL益肾清利活血方提取液于100mL容量瓶中，50%甲醇定容，摇匀，12000rmin转速离心10min，取上清液过0.22μm滤膜即得益肾清利活血方供试品溶液； 步骤2：标准品溶液的配置 精密称取适量的白藜芦醇、大黄酸、芒柄花黄素、芦荟大黄素、大黄素、绿原酸、虎杖苷、落新妇苷、金丝桃苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、β-蜕皮甾酮对照品于10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得到一定浓度的对照储备液，备用； 精密吸取白藜芦醇、大黄酸、芒柄花黄素、芦荟大黄素、大黄素、绿原酸、虎杖苷、落新妇苷、金丝桃苷对照储备液适量至同一容量瓶中，加入甲醇定容至刻度，摇匀，得到一定浓度的混合对照品工作液； 精密吸取毛蕊异黄酮葡萄糖苷、β-蜕皮甾酮储备液适量至同一容量瓶中，加入甲醇定容至刻度，摇匀，得到一定浓度的毛蕊异黄酮葡萄糖苷和β-蜕皮甾酮混合对照品工作液； 步骤3、标准曲线的制备 负离子模式：将步骤2制备得到的白藜芦醇、大黄酸、芒柄花黄素、芦荟大黄素、大黄素、绿原酸、虎杖苷、落新妇苷、金丝桃苷的混合对照品工作液，倍比稀释成不同浓度的混合对照品溶液，各取5μL进行HPLC-MSMS测定分析； 正离子模式：将步骤2制备得到的毛蕊异黄酮葡萄糖苷、β-蜕皮甾酮混合对照品工作液，倍比稀释成不同浓度的混合对照品溶液，各取5μL进行HPLC-MSMS测定分析； 标准曲线计算：对各标准品的线性浓度结合检测峰面积进行线性回归，得标准曲线方程； 步骤4、含量测定 在相同色谱和质谱条件下将步骤1制备得到的益肾清利活血方供试品溶液注入HPLC-MSMS测定分析，将检测到的化合物峰面积代入步骤3的标准曲线方程，计算得到益肾清利活血方中各化合物的含量； 步骤3和步骤4的色谱条件为：色谱柱：规格为2.1mm×150mm,2.7μm的WatersAurashellC18； 正离子模式流动相：A相0.1%甲酸B相乙腈，等度洗脱；流速0.2mLmin；柱温：40℃；离子源：ESI；定量模式：MRM；离子源电压：5500V；离子源温度：400℃； 正离子洗脱模式如下： ； 负离子模式流动相：A相2mmolL甲酸铵B相乙腈，梯度洗脱3分钟；流速0.2mLmin；柱温：40℃；离子源：ESI；定量模式：MRM；离子源电压：-4000V；离子源温度：400℃； 负离子洗脱模式如下： ； 步骤3和步骤4的质谱条件为： 使用API4000串联四极杆质谱仪和电喷雾电离接口在正离子模式和负离子模式下检测分析物；采用多反应监测模式监测前体向产物离子的转变，设置参数为：离子喷雾电压：4000V；涡轮加热器温度：500℃；碰撞活化解离：10psi；气帘气：25psi；具体质谱检测条件见下表： 标准品质谱检测条件 ； 步骤1所述的益肾清利活血方的中药组成为：生黄芪264份、当归88份、虎杖132份、六月雪264份、土茯苓264份、怀牛膝88份、石韦176份、制大黄53份、积雪草264份、制黄精176份、黄蜀葵花264份。

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